In vitro Callus Induction and Shoot Regeneration System of a Metal Accumulator Plant, Brassica nigra L.


Creative Commons License

kusur memon f., MEMON A.

Türk Tarım - Gıda Bilim ve Teknoloji dergisi, vol.9, no.11, pp.1993-1998, 2021 (Peer-Reviewed Journal) identifier

Abstract

This study established an efficient in vitro callus formation and plant regeneration protocol for a prevıously reported Cu accumulator, Brassica nigra, black mustard collected from Diyarbakir (Station site). Node explants from 10-day old mature plants were used for callus formation and shoot regeneration. The highest callus formation frequency (100%) was observed on Murasige Skoog (MS) medium containing 0.1 mg/L Benzylaminopurine (BAP) + 0.5 mg/L Naphthylacetic acid (NAA) (MS 2), 0.6 mg/L BAP + 0.2 mg/L NAA (MS 7), the highest shoot regeneration frequency (100%) was achieved on MS medium containing 0.6 mg/L BAP + 0.05 mg/L Indole butyric acid (IBA) (MS 8), 0.2 mg/L IBA + 0.2 mg/L NAA (MS 10) and the highest number of shoots per explant (3,25) was obtained on MS medium supplemented 0.6 mg/L BAP + 0.05 mg/L IBA (MS 8). After root, stem, and leaf formation from explants in MS medium, these plants were transferred to soil and grown in the plant growth room for one month. A dependable and effective shoot regeneration procedure was developed, laying the groundwork for genetic transformation in Brassica nigra.
Bu çalışmada, Cu akümülatörü olduğu tespit edilen Brassica nigra L. Diyarbakır genotipinin in vitro koşullarda kallus oluşumu ve sürgün gelişimi için etkili bir protokol oluşturulmuştur. Kallus oluşumu ve sürgün rejenerasyonu için 10 günlük olgun bitkilerden alınan nod eksplantları kullanılmıştır. En yüksek kallus oluşum yüzdesi (%100) 0,1 mg/L Benzilaminopürin (BAP) + 0,5 mg/L Naftalin asetik asit (NAA) (MS 2), 0,6 mg/L BAP 0,2 mg/L NAA (MS 7) içeren Murasige Skoog (MS) besin ortamlarında gözlenirken, en yüksek sürgün oluşum yüzdesi ise (%100) 0,6 mg/L BAP + 0,05 mg/L İndol bütirik asit (IBA) (MS 8), 0,2 mg / L IBA + 0,2 mg / L NAA (MS 10) ortamlarında gözlemlenmiştir. Eksplant başına en yüksek sürgün sayısı (3,25) 0,6 mg/L BAP + 0,05 mg/L IBA (MS 8) takviyeli MS ortamından elde edilmiştir. MS ortamında eksplantlarda kök, gövde ve yaprak oluşumu meydana geldikten sonra, bu bitkiler toprağa aktarılmış, bitki büyüme odasına alınmış ve bir ay büyütülmüştür. Yapılan bu çalışmayla Brassica nigra'da genetik dönüşümün temelini oluşturan güvenilir ve verimli bir sürgün rejenerasyon protokolü oluşturulmuştur.